1.將已經(jīng)過(guò)濾并脫氣的流動(dòng)相注入儲(chǔ)液罐。
2. 用流動(dòng)相沖洗金屬過(guò)濾器,然后將過(guò)濾器浸入儲(chǔ)液罐的流動(dòng)相中。
3. 將儲(chǔ)液罐放置在一定的高度,以避免由于搬運(yùn)和其他操作人員的移動(dòng)而造成不必要的跌落。
4. 然后按以下順序依次啟動(dòng)高效液相色譜儀:泵→檢測(cè)器→高效液相色譜軟件→按預(yù)先計(jì)劃的方法設(shè)置軟件參數(shù)。
5. 啟動(dòng)泵,運(yùn)行5分鐘,主要是為了排除系統(tǒng)中的氣泡,結(jié)束后關(guān)閉所有排氣閥。
6. 然后按照預(yù)先計(jì)劃的速度,以固定的速率,如1mL/min左右,運(yùn)行流動(dòng)相,走基線,直到基線平穩(wěn),就可以在計(jì)算機(jī)軟件上進(jìn)行監(jiān)視。
7. 基線平穩(wěn)后,在軟件中設(shè)置樣品的運(yùn)行參數(shù),如流速和分析時(shí)間等。分析時(shí)間會(huì)因樣品、流速、柱長(zhǎng)等因素變化。
8. 參數(shù)設(shè)置完畢后,將固定體積的樣品溶液注入進(jìn)樣閥,然后在軟件中啟動(dòng)注入命令,進(jìn)樣器中的樣品溶液就隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱。
9. 通過(guò)軟件監(jiān)視各項(xiàng)讀數(shù),當(dāng)檢測(cè)器檢測(cè)到樣品所有峰值,停止運(yùn)行并設(shè)置新的進(jìn)樣。在下一個(gè)樣品分析前,建議留出5-10分鐘,待流動(dòng)相通過(guò)色譜柱,以便清洗之前樣品的殘留物;確認(rèn)基線穩(wěn)定后,進(jìn)行下一次注射。
10. 分析結(jié)束后,先關(guān)閉檢測(cè)器,然后關(guān)閉泵,最后關(guān)閉軟件。