分光光度計是目前化驗室中使用比較廣泛的一種分析儀器,其測定原理是利用物質(zhì)對光的選擇性吸收性,以較的單色光作為入射光,測定物質(zhì)對光的吸收,從而確定溶液中物質(zhì)的含量。在比色分析中,有色物質(zhì)溶液顏色的深度決定于入射光的強(qiáng)度、有色物質(zhì)溶液的濃度及液層的厚度。當(dāng)一束單色光照射溶液時,入射光強(qiáng)度愈強(qiáng),溶液濃度愈大,液層厚度愈厚,溶液對光的吸收愈多,它們之間的關(guān)系,符合物質(zhì)對光吸收的定量定律。
1、在使用儀器前,必須仔細(xì)閱讀其使用說明書。
2、若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新調(diào)零及滿度后,再測量。
3、指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
4、操作人員不應(yīng)輕易觸動燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
5、放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。
6、比色皿使用時要注意其方向性,并應(yīng)配套使用,以延長其使用壽命。新的比色皿使用前必須進(jìn)行配對選擇,測定其相對厚度,互相偏差不得超過2%透光度,否則影響測定結(jié)果。使用完畢后,請立即用蒸餾水沖洗干凈(測定有色溶液后,應(yīng)先用相應(yīng)的溶劑或(1+3)的硝酸進(jìn)行浸泡,浸泡時間不宜過長,再用蒸餾水沖洗干凈),并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
7、比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題。先,應(yīng)保證比色皿不傾斜。因為稍許傾斜,就會使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致,還有可能使入射光不能全部通過樣品池,導(dǎo)致測試準(zhǔn)確度不符合要求。其次,應(yīng)保證每次測試時,比色皿架推拉到位。若不到位,將影響到測試值的重復(fù)性或準(zhǔn)確度。
8、干燥劑的使用問題。干燥劑失效將會導(dǎo)致以下問題:①數(shù)顯不穩(wěn),無法調(diào)零或滿度。②反射鏡發(fā)霉或沾污,影響光效率,雜散光增加。因此分光光度計應(yīng)放置在遠(yuǎn)離水池等濕度大的地方,并且干燥劑應(yīng)定期更換或烘烤。
9、分光光度計的放置位置應(yīng)符合以下條件:避免直射;避免強(qiáng)電場;避免與較大功率的電器設(shè)備共電;避開腐蝕性氣體等。